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    藏紅花球莖腐爛病的病原鑒定及藥劑預防

    藏紅花球莖腐爛病的病原鑒定及藥劑預防

    張國輝 張西平 張年富 賀定翔

    凱里學院學報第27卷第3期 2009年6月

     

    摘要:藏紅花球莖腐爛病是貴州省種植基地的主要病害并造成了很大的經濟損失,實驗結果表明,該病害是由鐮刀菌和炭疽菌引起的。筆者采用低毒、低殘留殺菌劑即多菌靈(Bavistin)、百菌清(Daconil)、代森錳鋅(Mancozeb)、甲基托布津(Top sin)進行藥劑預防測定,結果表明多菌靈等能明顯抑制或減輕腐爛病的發生。

    關鍵詞:藏紅花;藥劑預防;腐爛病;鐮刀菌;炭疽菌

     

    藏紅花(Crocus sativus L.)又稱番紅花、西紅花,撒馥蘭等,屬鳶尾科番紅花屬多年生草本植物。因花絲中含有活血化瘀、涼血解毒、解郁安神、健胃等功效的成分,具有疏經活絡、通經化淤、散淤開結、消腫止痛、涼血解毒、憂思郁結的作用,長期堅持服用可全面提高人體的免疫力的功效,故其具有較高的藥用價值。此外,藏紅花還可大量用于日用化工、食品、染料工業,是美容化妝品與香料制品的寶貴原料,球莖又可做為高檔觀賞花卉出售,因此,藏紅花也具有較高的經濟價值。在中國,已將其列入國家科技部重點開發項目,2002年又被國家中醫藥管理局列為重點發展的中藥材品種。

    球莖腐爛病是我國藏紅花生產上的重要病害,貴州省凱里信邦藥材公司首次引種一定規模的藏紅花就遭到該病害的侵染造成了很大經濟損失,隨著種植面積的擴大,球莖腐爛病也日趨嚴重,從而影響了球莖和藏紅花的產量和品質,為了減輕病害對藏紅花品質、產量的影響,從而使其藥用和觀賞價值得以更好體現,也為了在生產各類名貴藥材中更好地應用現代生物技術,本文對侵染藏紅花球莖腐爛病的病原菌進行了病原鑒定及其藥劑預防研究。

     

    1 材料與方法

    1.1 試驗時間、地點

    室外試驗于2006年10月在凱里信邦藥材公司藥材基地進行,室內試驗于2006年11在凱里學院進行。

    1.2 供試材料和供試藥劑

    供試藏紅花患病球莖由貴州省凱里信邦藥材公司藥材基地(室內)采集。

    供試藥劑為50%多菌靈WP(Bavistin)(無錫市農藥有限公司)、75%百菌清WP(Daconil)(重慶易豐科技發展有限公司)、50%代森錳鋅WP(Mancozeb)(西安近代農藥有限責任公司)、70%甲基托布津WP(Top sin)(山東奧豐生物工程有限公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 實地調查 對貴州凱里信邦藥材公司的藏紅花進行實地調查,了解病害的種類、分布和為害狀況。

    1.3.2 癥狀的觀察與描述 癥狀的觀察主要是對病組織的表面病斑形態、病部顏色、病斑的大小等方面進行觀察和描述。

    1.3.3 顯微鏡檢查 顯微鏡檢查分為真菌病害標本和病原菌的顯微鏡檢查兩個方面,主要是觀察菌絲體和其他營養體的結構、孢子的形態和著生方式、子實體的形態結構和產生部位等。同時,對部分病菌在多媒體教室數碼顯微鏡下拍攝照片,進行記錄。

    1.4 實驗方法

    1.4.1 培養基的制備 馬鈴薯蔗糖培養基(PSA):馬鈴薯200g、蔗糖15~17g、瓊脂17~20g、水1000g,121℃,滅菌30min。

    1.4.2 病原菌的分離和培養 對病原真菌的分離采用組織表面分離法。先用70%的酒精對藏紅花球莖病害的病斑部進行表面消毒處理,再輕過火焰一下,然后切去表皮,切取內部病健交界處的小塊組織,移入PSA平板內培養基上,28~30℃條件下培養3~4d。待培養皿內病組織的周圍長出菌絲體后,挑取先端菌絲,分別移置到新的PSA培養基上,依次重復多次,無菌條件下鏡檢是否獲得純培養,直至得到純的病原菌進行純培養,之后待菌落長出后挑取前緣菌絲,回接于牛肉膏蛋白胨和PSA斜面培養基上,在28℃溫箱中培養,作為備用。

    1.4.3 病原菌的鑒定 將純化后的菌株點植于PSA培養基上,觀察培養性狀,鏡檢形態特征,測量其菌落生長速度,根據陳鴻逵、王拱辰的浙江鐮刀志以及柏斯(Booth.1978)的鐮刀菌鑒定方法,挑取培養一定時間的菌落,在顯微鏡下觀察各種類型的孢子形態,并查閱文獻作病原菌鑒定,同時,對部分病菌在多媒體教室數碼顯微鏡下拍攝照片,進行記錄。

    1.4.4 藥劑對病原菌的抑制測定 本試驗在PSA培養基上進行,共5個處理,每個處理重復3次。選取國內外常用殺菌劑:多菌靈(Bavistin)、百菌清(Daconil)、代森錳鋅(Mancozeb)、甲基托布津(Top sin),稀釋至1000倍,然后向培養皿內移入1ml藥液,再加9ml已滅菌的培養基混勻。用于對照的培養皿內加無菌水1ml,再加9ml已滅菌的培養基混勻即可。移接一枚直徑為5mm的菌苔置于平皿中央,28℃倒置培養2d后,測量菌落直徑,重復3次求平均值;并計算藥劑對菌落生長的相對抑制率。

     

    2 結果與分析

    2.1 癥狀觀察與描述

    帶菌球莖出芽時,芽頭上出現黃褐色水漬狀斑點,氣溫高濕度大時擴展很快,引起芽頭腐爛而死亡。大田栽培根、球莖盤染病時產生黃褐色凹陷斑,邊緣不整齊,后腐爛,鱗莖皺縮干腐。病斑橢圓形,略凹陷,病健交界很明顯,大小為10~30mm。病斑部有灰黑色霉層,邊緣呈淺紅色,幼芽呈彎曲、倒塌(正常的植株的幼芽呈直立)。見圖1所示。

     

    圖1 藏紅花球莖腐爛病的癥狀

    圖1 藏紅花球莖腐爛病的癥狀

     

    2.2 病原菌鑒定

    對罹病球莖的致病菌進行分離和鑒定,藏紅花球莖腐爛病由炭疽菌和鐮刀菌的交互侵染導致。鑒定結果為尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum Schlecbt),另外,還分離到一種炭疽菌,也為致病菌。通過實驗鑒定表明,菌落前期的鐮刀菌數量比炭疽菌多,因此,前期藏紅花腐爛病主要是鐮刀菌,而后期的炭疽菌入侵會加重病害的蔓延。

    炭疽菌(Anthracnose sp)的分生孢子體型較小,兩頭鈍圓,單胞無色,橢圓型,每個孢子有2個油球,菌絲無色、無隔膜;鐮刀菌(Fusarium oxysporum Schlecbt)的分生孢子體型較大,兩頭向內側稍彎曲,細長,呈新月形或鐮刀形,一般都有2~4個隔膜。菌絲無色、有隔膜(見圖2)。

     

    圖2 藏紅花球莖腐爛病的鐮刀菌和炭疽菌的分生孢子

    圖2 藏紅花球莖腐爛病的鐮刀菌和炭疽菌的分生孢子(10×40)

     

    2.3 藥劑對病菌的抑制測定

    殺菌劑對致病的鐮刀菌和炭疽菌有較好的抑制作用,本實驗的藥劑主要用于預防作用且不影響到藥材生產和銷售,故以殺滅、抑制病菌和保護作用為機理,選擇和采用低毒、低殘留殺菌劑用于病害的預防。

    4種殺菌劑對鐮刀菌、炭疽菌菌絲生長的抑制作用測定如下,見表1所示。

     

    表1 藥劑對藏紅花病菌的生長抑制測定

    表1 藥劑對藏紅花病菌的生長抑制測定

     

    殺菌劑對鐮刀菌、炭疽菌菌絲生長的抑制作用測定結果表明,供試的4種藥劑對致病的鐮刀菌、炭疽菌都具有抑制作用。其中,多菌靈的抑制作用最強。如:表2所示,抑菌率公式為:抑菌率=[(對照菌落直徑-5)-(處理菌落直徑-5)]/(對照菌落直徑-5)×100%。

     

    表2 不同藥劑對藏紅花病菌的抑制效果

    表2 不同藥劑對藏紅花病菌的抑制效果

     

    3 討論

    3.1 鐮刀菌和炭疽菌交互侵染是引起藏紅花球莖腐爛病的主因

    藏紅花球莖腐爛病發生極為普遍,凱里信邦藥材公司引種的藏紅花發病率高達70%左右,對該公司造成了很大的經濟損失,尤其在發芽有4~7cm時發病率最高。根據調查和研究,藏紅花球莖腐爛病主要是由鐮刀菌和炭疽菌交互侵染所引起的,前期主要是由鐮刀菌侵染,而后期的炭疽菌入侵會加重病害的蔓延。根據炭疽菌具有潛伏侵染這一特征,我們可以知道炭疽菌是在鐮刀菌的基礎上加重藏紅花腐爛病。因此藏紅花腐爛病主要是由鐮刀菌和炭疽菌交互侵染引起的。

    3.2 環境因素和人為因素對藏紅花病害發生的影響

    藏紅花生長期是秋季的8月~10月,在這個時期,炭疽菌和鐮刀菌正是頻發期,而且藏紅花幼種的免疫能力差。因此,在栽種藏紅花幼種時,我們對藏紅花的幼種要進行嚴格的消毒和對它生長環境要有嚴格的要求,如溫度、光照、通風程度、和土壤的酸堿度等等。在對信邦藥材公司進行調查時,信邦藥材公司的管理人員說到,在他們發現藏紅花腐爛病時,他們認為是由細菌病害引起,他們就利用含銅的試劑進行消毒。而藏紅花的腐爛病是屬于真菌病害,含銅試劑對真菌病害根本不起作用,因此,由于人為因素的原因,也間接造成了該公司巨大的經濟損失。

    3.3 探討藏紅花球莖腐爛病的預防措施

    藏紅花屬亞熱帶植物,喜溫和、涼爽,怕炎熱,較耐寒。土壤以肥沃的沙質土為好,忌積水,合理的生態環境可以減少病菌的數量及生存。藏紅花無種子,以球莖繁殖,在球莖栽種前,經過藥劑處理,可防止病危害,藏紅花主要病害就是球莖腐爛病,選用低毒、低殘留的農藥是藥材公司的最佳選擇,跟據本次實驗表明,多菌靈的效果顯著強于其他幾種農藥,多菌靈是一種高效低毒內吸性殺菌劑,可以影響病菌的細胞分裂,從而限制病菌的繁殖和危害,多菌靈具有保護和治療的作用。因此可用它來作處理球莖的藥劑,即可用多菌靈殺菌劑浸種。為了增強預防效果,也可采用多菌靈與其它殺菌劑合用的方法。一般用25%多菌靈500倍液與三氯殺螨醇或樂果3000倍液,兩種藥液混合,浸種20分鐘,立即下種,病害預防的效果較為顯著。

     

    Investigation and medicament prevention on stem rot disease of Crocus sativus

    ZHANG Guo-hui, ZHANG Xi-ping, ZHANG Nian-fu, HE Ding-xiang

     

    Abstract: Stem rot disease of Crocus sativus has become a serious disease for its damage , the results show that the disease is caused by Colletot richum sp. and Fusarium oxysporum . The Medicament Prevention using low toxicity , low-residue fungicides , Bavistin 、Daconil 、Mancozeb 、Top sin , could inhibit or reduce the incidence of decay .

    Key words: Crocus sativus L. ; Medicament prevention ; Stem Rot Disease ; Fusarium oxysporum ; Colletotrichum


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    標簽:藏紅花 球莖 腐爛病

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